本發(fā)明涉及克拉瓦雷酸（暫譯此名，原文為ClavulanicAcid）及其可供藥用的鹽和酯的制備方法。

克拉瓦雷酸即（2R，5R，Z）-3-（2-羥亞乙基）-7-氧代-4-氧雜-1-氮雜雙環(huán)〔3，2，0〕-庚烷-2-羧酸是一種已知的化合物，其結(jié)構(gòu)如下：

該化合物及其鹽和酯，可作為β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，能抑制由革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性有機(jī)體所產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶的活動(dòng)。因此這些化合物可用在藥物成份里，以防止β-內(nèi)酰胺抗生素的失活。此外，克拉瓦雷酸本身也具有抗菌活性。

克拉瓦雷酸是由各種不同菌株的微生物產(chǎn)生的，例如，這些菌珠屬于鏈霉菌屬的有：S.ClavuligerusNRRL3585（美國(guó)專利4110165），S.jumonjinensisNRRL5741（英國(guó)專利1，563，103），S.KatsurahamanusIFO13716（日本專利83，009，579）和鏈霉菌屬球菌（SP.）P6621FERM2804（日本專利55，162，993）。

人們一直通過改進(jìn)發(fā)酵過程來提高克拉瓦雷酸的產(chǎn)量。例如英國(guó)專利1，571，888透露，嚴(yán)格地將pH控制在6.3至6.7范圍內(nèi)可以顯著地增加產(chǎn)量。

增加產(chǎn)量的辦法，更常用的是改進(jìn)純化過程。例如，由于克拉瓦雷酸的鹽通常比游離酸更穩(wěn)定，因此，可采用其鹽，例如堿金屬和堿土金屬的鹽來增加萃提產(chǎn)量。

美國(guó)專利4，110，165敘述了一種基于克拉瓦雷酸及其鹽在水相和有機(jī)相之間溶解度不同的萃取過程。在萃取之后還要用吸附劑提純幾次。因此，這種萃取方法過于沉長(zhǎng)又不經(jīng)濟(jì)。

所以，直接從有機(jī)相將克拉瓦雷酸結(jié)晶出來更為理想。按西班牙專利494，431的辦法，是在有機(jī)相中加入胺，如叔丁胺，可以使克拉瓦雷酸直接從有機(jī)相中結(jié)晶出來，然后與一個(gè)堿交換，就可轉(zhuǎn)化成鉀鹽。

鋰鹽也被認(rèn)為是一種制備克拉瓦雷酸的有用的中間體，因?yàn)樗芙舛鹊投液苋菀邹D(zhuǎn)化成可供藥物制劑采用的鹽和酯。例如，美國(guó)專利4，490，294透露，克拉瓦雷酸溶液與離子型的鋰化合物的水溶液反應(yīng)可生成克拉瓦雷酸鋰。英國(guó)專利1，543，563透露了另一種制備克拉瓦雷酸鋰的路線，該路線是采用經(jīng)粒狀炭過濾后的肉湯進(jìn)行吸附，再用離子交換樹脂處理，然后將克拉瓦雷酸鋰進(jìn)行結(jié)晶。

也有人提出，發(fā)酵的肉湯直接吸附在樹脂上之后，用異丙醇作溶劑將克拉瓦雷酸鋰結(jié)晶出來。這個(gè)過程很難實(shí)現(xiàn)而且產(chǎn)量極低。

由此看來，采用現(xiàn)有技術(shù)的發(fā)酵和純化方法，只能制得不純的克拉瓦雷酸，而且產(chǎn)量相當(dāng)?shù)汀?/p>

根據(jù)本發(fā)明的第一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種利用繁殖的微生物在培養(yǎng)基中發(fā)酵的方法制備克拉瓦雷酸的方法，按照這種方法，在發(fā)酵過程中至少要加入部分的可同化碳源?？梢韵噜彛皇芾碚撍拗?，若有控制地加入碳源就不會(huì)出現(xiàn)降解代謝調(diào)節(jié)。不管理論是怎么說的，現(xiàn)已觀察到，在發(fā)酵過程的任何一個(gè)時(shí)間，小心地避免碳含量變得太高，就可以使發(fā)酵獲得顯著的改進(jìn)。下面列舉一些比較理想的實(shí)施例子：

將可同化碳源的含量保持在低于2%較為理想，低于1%則更好（對(duì)于固體碳源，百分率是以重量/體積作根據(jù)，對(duì)于液體碳源，則以體積/體積作根據(jù)）。同樣道理，將碳源加入到有效培養(yǎng)基中時(shí)，應(yīng)以少量加入為宜，可采用分批加入，也可采用連續(xù)加入。但無論采用哪種加入方式，碳源的加入量，相對(duì)于培養(yǎng)基來說，以不超過1%為好，不超過0.5%更好。實(shí)際上，培養(yǎng)基中碳含量維持在低于0.25%，例如低于0.15%比較好。任何可同化碳源都可使用，包括多羥基化合物或碳水化合物，但最好是采用一種化學(xué)結(jié)構(gòu)明確的碳源（亦即是一種化學(xué)結(jié)構(gòu)已知的含碳化合物）。確定的碳源的分子量一般低于500。分子中所含碳原子數(shù)目最多為12個(gè)比較合適，例如單糖或雙糖，或線型多羥基化合物。這類化合物的例子包括麥芽糖和甘油。本發(fā)明另一較佳的選擇，可同化碳源是糊精，淀粉或糊化淀粉，更廣泛地說，碳源通常是可溶于水或可溶混于水的。

S.clavuligerus的應(yīng)用，特別是S.clavligerusNRRL3585，現(xiàn)在較為普及。對(duì)于這些微生物，較適合的碳源包括麥芽糖，甘油，糊精和糊化或未糊化的淀粉。葡萄糖、果糖、蔗糖和乳糖不太容易被S.clavuligerus同化，所以對(duì)于這類微生物不太適用。

碳源可以是連續(xù)地或間歇地?fù)饺耄詈媚苁顾艿较拗?，就是使碳源含量在任何時(shí)候不會(huì)高過2%。例如，摻入過程可以是連續(xù)的，這是用少量的碳源恒定地按規(guī)定量供給培養(yǎng)基。連續(xù)加入最適宜的速度約為每小時(shí)0.01至0.1%每天0.5至1.5%更好，特別好的速度約為每小時(shí)0.05%。另一可選擇的形式是，摻入按照預(yù)先的規(guī)定，分批逐次的進(jìn)行。例如，間歇加入的時(shí)間間隔一般是由每分鐘至每六小時(shí)。每天總加入量可為0.25%至1.5%，然而每天的加入量為0.5至1.5%時(shí)是最佳的。

摻入方式不必按照不變的形式進(jìn)行。因此，開頭60小時(shí)的摻入量可以維持在每天0.5%或1%，在其余的發(fā)酵時(shí)間，每天的加入量可分別為1%或0.5%。此外，在接種時(shí)，起初在培養(yǎng)基中碳源含量較適合的范圍0%至2%，0%至0.5%更好，0%至0.05%則最好。

連續(xù)或間歇式的加入碳源最好是在無菌狀態(tài)下進(jìn)行，最好提供方法來保證及維持這種無菌狀態(tài)。再者，固體碳源最好是以水溶液加入。液體碳源可以直接加入或經(jīng)適當(dāng)稀釋后加入。

發(fā)酵介質(zhì)可以包含其它適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)成份，包括有機(jī)氮源。這種氮源可包含含油種子，可選擇的是脫脂粗面粉，蛋白質(zhì)水解液或其提取物。必要時(shí)，可將天然鹽（尤其是氯化物，硫酸鹽，碳酸鹽或磷酸鹽）和無機(jī)或有機(jī)去沫劑，連同其它已知介質(zhì)成份，一起加入。最佳發(fā)酵溫度一般為24至30℃之間，特別是26℃至28℃，然而本發(fā)明則卻不限制這些溫度內(nèi)，因?yàn)楸景l(fā)明的發(fā)酵過程可以在高于或低于這些溫度進(jìn)行。發(fā)酵通常是在間歇式系統(tǒng)中進(jìn)行1至幾天，更通常是由24至240小時(shí)，而多數(shù)情況是100至200小時(shí)。

對(duì)于本發(fā)明最合適的發(fā)酵容器是傳統(tǒng)的有氧發(fā)酵容器，這種容器帶有攪拌和通氣裝置。這種容器的容量可以由1升至225立方米不等。實(shí)用容量最好是總?cè)萘康?5～75%。

在肉湯后處理中，最好采用過濾或離心的方法將固體物質(zhì)從發(fā)酵肉湯中除掉。肉湯最好是酸化到pH值為1至3，pH值約為2時(shí)更好，克拉瓦雷酸可通過加入不與水混溶的溶劑進(jìn)行萃取，將兩相用例如離心法分開，由此便在不與水混溶的一相中得到克拉瓦雷酸。

本發(fā)明還包括制備克拉瓦雷酸的新方法，即以鋰鹽的形式獲得克拉瓦雷酸，或可選擇地將克拉瓦雷酸鋰轉(zhuǎn)變?yōu)檫@種酸的其它鹽類或酯類。

因此，更明確地說，根據(jù)本發(fā)明的第二個(gè)方面，本發(fā)明提供一個(gè)純化克拉瓦雷酸的方法，該方法包括下列三個(gè)步驟：

（Ⅰ）將已溶解的不純的克拉瓦雷酸與已溶解的2-乙基己酸鋰混合，酸和鹽最好是各自溶于不與水混溶的溶劑中，最好是用同一種溶劑

（Ⅱ）將克拉瓦雷酸鋰離析出來;

（Ⅲ）可選擇地將鋰鹽轉(zhuǎn)變成另一種鹽或酯。

采用這種方法既可能得到較高的產(chǎn)量又可以提高其純度。本方法對(duì)于克拉瓦雷酸發(fā)酵肉湯的純化具有普遍的適用性，而對(duì)于純化根據(jù)本發(fā)明第一個(gè)方面所制備的提取物則更為適用。正如上面所提到的，這種發(fā)酵可以很容易地在與水不混溶的溶劑（這種溶劑適用于步驟Ⅰ）中產(chǎn)生不純的克拉瓦雷酸溶液。較合用的有機(jī)溶液是乙酸乙酯，乙酸甲酯，乙酸戊酯，甲基異丁基酮或正丁醇，以正丁醇為最佳。肉湯的萃取在4至10℃進(jìn)行較好，其目的是為了使克拉瓦雷酸的分解損失量減至最小。

萃取之后，加入按已知方法制備的2-乙基己酸鋰溶液，進(jìn)行結(jié)晶。優(yōu)先的選擇是，克拉瓦雷酸在有機(jī)溶液中的濃度應(yīng)大于10毫克/毫升。結(jié)晶最好在低溫下進(jìn)行，一般在4至10℃之間。因?yàn)榭死呃姿徜囀桥c四分之一個(gè)水分子一起結(jié)晶的，所以建議在含有低濃度水，例如含2%至4%水的有機(jī)溶液中進(jìn)行結(jié)晶。用過量的2-乙基己酸鋰較好。2-乙基己酸鋰應(yīng)在攪拌和冷卻下緩慢加入。當(dāng)所有2-乙基己酸鋰加完之后，最好再攪拌一段時(shí)間。然后，將所得到克拉瓦雷酸鋰進(jìn)行進(jìn)一步的處理，最好是先經(jīng)玻璃片過濾，再分別用異丙醇，丙酮和乙醚洗滌，最后在真空下干燥。

可以將克拉瓦雷酸鋰重結(jié)晶。重結(jié)晶的辦法是在克拉瓦雷酸鋰的水溶液中加入過量的有機(jī)溶劑，而鋰鹽在這種溶劑中的溶解度很低，溶劑以異丙醇為佳。另一種更好的辦法是將另一種鋰鹽的濃溶液加入到克拉瓦雷酸鋰的水溶液中，使之重結(jié)晶。適用的鋰鹽包括那些在水中溶解度高的有機(jī)或無機(jī)鋰鹽，氯化鋰最為適合。鋰鹽溶液的濃度大于50%比較合適，而且應(yīng)加入足夠的溶液以便使最后濃度大于25%。鋰鹽溶液最好是緩慢地加入，同時(shí)應(yīng)進(jìn)行攪拌。

經(jīng)過重結(jié)晶的克拉瓦雷酸鋰可進(jìn)一步提純，例如，可以是用過濾法分離，用丙酮洗滌，然后在真空下干燥，由此所得產(chǎn)率高于80%，純度高于85%。

根據(jù)本發(fā)明的方法制備的克拉瓦雷酸鋰可以用離子交換方法轉(zhuǎn)變成其它鹽類，樹脂可采用所要求的陽(yáng)離子型交換樹脂，用鈉型或鉀型較好洗脫液可用水。此外，該酸的酯類可采用已知方法來制備。作為制備鋰鹽的另一種更常用的方法，本發(fā)明還提出了一系列改進(jìn)，即利用一種交換容量較高的離子交換樹脂來萃取克拉瓦雷酸。適用的樹脂的例子有，例如在英國(guó)專利1，534，563中所敘的樹脂。樹脂以弱堿性離子交換樹脂為好，其型號(hào)為IRA-68，而且以乙酸鹽的形式的樹脂為佳。

發(fā)酵肉湯的初始活性以每毫升中含800微克以上的克拉瓦雷酸為較合適，以便肉湯在用離子交換樹脂吸附并用鋰鹽洗脫，接著，例如用異丙醇結(jié)晶后能得到克拉瓦雷酸鋰的良好晶體。

肉湯用樹脂吸附之前，最好先進(jìn)行澄清。

根據(jù)本發(fā)明的第三個(gè)方面，發(fā)酵肉湯用聚集劑處理，以便使菌絲體聚集起來。

將菌絲體聚集起來有利于過濾。過濾輔助劑Prasetol（德國(guó)BayerAG的商標(biāo)）是一種適合的聚集體。輔助劑最好以0.1至0.5%的濃度加入到肉湯中，混合物在過濾前需要攪拌大約15分鐘。過濾本身就是將混合物通過一個(gè)無機(jī)過濾材料，如Dicalite的床層比較合適（一般約6%重量：容積）（Dicalite是Dicalite有限公司的一個(gè)商標(biāo)）。如果過濾出來的首批溶液澄清不好，則可令其重新通過同樣的Dicalite予備層，再次過濾。肉湯也可以在過濾之后用離心法澄清。（一般是在每分鐘10，000轉(zhuǎn)的速度下離心30分鐘）。

本發(fā)明的另一個(gè)改進(jìn)是增加離子交換樹脂的吸附容量，這是利用已過濾的肉湯的脫蛋白作用來達(dá)到的。

脫蛋白作用最好通過酸化來實(shí)現(xiàn)，通常酸化到pH＝4，也可采用沉淀溶劑如丙酮來處理。

在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，經(jīng)過過濾的肉湯的pH值用無機(jī)酸，如鹽酸或硫酸調(diào)到4左右。當(dāng)pH調(diào)好后，清液層便吸附在樹脂上。最好先讓肉湯靜置一段時(shí)間，如有混濁，可用離心法清除。為避免由于pH在4左右而使產(chǎn)物損失，在用樹脂吸附之前，可將混合物的pH值調(diào)回到6。用這種辦法可以使pH＝6的乙酸鹽形式的樹脂的吸附容量增加。經(jīng)過過濾的肉湯∶樹脂（容積/容積）的比例以不大于10∶1為宜

過濾后的肉湯也可以用沉淀溶劑，如丙酮來處理，從而脫除蛋白。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，一容積的肉湯與約一容積的丙酮混合。比較好的操作方法是，將肉湯與丙酮一起攪拌5至10分鐘，然后令其靜置20分鐘，將沉淀物用離心法或過濾法分離。這樣澄清過的肉湯就適合于用樹脂來吸附。肉湯吸附之前，可進(jìn)行減壓蒸餾，以回收其中的丙酮。無論丙酮有否被除去，經(jīng)過過濾的肉湯都可以用樹脂來吸附，其比例由10∶1至12∶1（此比例是指經(jīng)過過濾的肉湯的初始容積∶樹脂容積）而且沒有顯著的損失。從離子交換樹脂洗脫液中結(jié)晶出來的克拉瓦雷酸鋰，首先會(huì)形成膠狀，在某些情況下，純度很低。為了解決這個(gè)問題，最好先用0.5%氯化鈉清洗或預(yù)先洗脫樹脂，接著用水清洗，然后才用鋰鹽，如5%氯化鋰洗脫。用丙酮處理洗脫液可以進(jìn)一步改進(jìn)克拉瓦雷酸鋰的結(jié)晶過程。例如，可把樹脂洗脫液與兩倍體積的丙酮一起攪拌，然后令其靜置15分鐘。再用離心法將沉淀物分離，除去丙酮后，用異丙醇將克拉瓦雷酸鋰結(jié)晶出來。

總之，本發(fā)明可以很容易地制備克拉瓦雷酸及其的鹽和酯，這些形式都適用于藥物制劑。

本發(fā)明可用下列例子來說明，但并不被這些例子所限制。

例子1

先準(zhǔn)備好下例的培養(yǎng)基：

魚粉2.0克

甘油1.5克

可溶淀粉1.5克

碳酸鈣0.2克

蒸餾水加至100毫升

將pH值調(diào)到7，將40毫升的等分試樣放入容量為250毫升的愛倫美氏瓶中，進(jìn)行消毒。然后在培養(yǎng)基中接種S.clavuligerusNRRL3858孢子的懸浮體，在攪拌下于28℃培育2天。該培養(yǎng)物再接種到裝有500毫升同樣培養(yǎng)基的容量為2升的愛倫美氏瓶中，其濃度為2%。培養(yǎng)過程也是在旋轉(zhuǎn)振動(dòng)器中在28℃進(jìn)行兩天。

將由此所制得的500毫升培養(yǎng)物接種到一個(gè)容量為340升的不銹鋼容器中，該容器裝有攪拌、通氣及溫度控制裝置。該容器裝有100升由以下成份組成的無菌培養(yǎng)基：

大豆粉3%

玉米糊精3%

大豆油0.5%

KH2PO40.1%

去泡劑（烏康）0.005

自來水加至規(guī)定體積。

已接種的培養(yǎng)基在28℃下培育，一邊鼓入空氣，一邊攪拌，并維持45小時(shí)。然后，在另一個(gè)裝有150升同樣培養(yǎng)基的容積為340升的容器中接種該培養(yǎng)液7%。培育過程是在28℃，在攪拌及通氣情況下進(jìn)行30小時(shí)。

完成后，用這些培養(yǎng)物來接種大貯罐中的生產(chǎn)克拉瓦雷酸的培養(yǎng)基接種濃度為7%。大貯罐總?cè)萘窟_(dá)800升，內(nèi)裝425升由下列成份組成的培養(yǎng)基：

大豆粉1.25%

花生粉1.25%

干酒槽0.5%

磷酸二氫鉀0.1%

去泡劑（烏康）0.005%

自來水加至規(guī)定體積。

將pH值調(diào)到6.7，然后，在121℃進(jìn)行消毒20分鐘。每隔1小時(shí)加入一次甘油，加入量如下：

時(shí)間（小時(shí)）速度（毫升/小時(shí)）總甘油量

0至121800.5%

13至961903.7%

97至1601001.5%

發(fā)酵是在26℃在攪拌及通氣情況下進(jìn)行的。經(jīng)過160小時(shí)之后，克拉瓦雷酸的含量相當(dāng)高，可達(dá)1403微克/毫升。

例子2和3

比較例子1和2

在發(fā)酵過程中逐步加入甘油與一開始便加入所有甘油這兩種作法對(duì)發(fā)酵的影響是不同的，下表說明兩者比較結(jié)果：

例子＊甘油（%）克拉瓦雷酸

初始加入112小時(shí)160小時(shí)

E205.78191403

E314.8402669

CE13.50359273

CE25.50198199

＊E，例子CE，比較例子

在發(fā)酵中摻入可同化碳源，可使產(chǎn)量顯著增加。

例子4

在容積為75升的發(fā)酵器中，用同樣的培養(yǎng)液接種40升與例1相同的發(fā)酵生產(chǎn)培養(yǎng)基。然后用一種連續(xù)加料隔膜泵，不斷地加入經(jīng)消毒的5%的麥芽糖水溶液，加入速度為每天800毫升（1%麥芽糖/每天）歷時(shí)112小時(shí)后收集肉湯準(zhǔn)備萃取。發(fā)酵器用傳統(tǒng)方式攪拌及曝氣。經(jīng)過112小時(shí)后，肉湯中克拉瓦雷酸的濃度為1424微克/毫升。

例子5

將7.5升正丁醇加入到7.5升由例子1所得經(jīng)過過濾的肉湯，用4N冷硫酸將pH調(diào)到2，將混合物離心到16，000克，由此分成兩相，水相和丁醇相。丁醇相在35℃及減壓下濃縮到200毫升。用這方法，在200毫升正丁醇得到克拉瓦雷酸溶液的濃度為26.7毫克/毫升。加入5毫升水，使含水量達(dá)到2.52%。在攪拌下，將100毫升10%的2-乙基己酸鋰的正丁醇溶液加入到上述溶液中。將總?cè)莘e濃縮到150毫升，在5℃攪拌兩小時(shí)，然后用一過濾片過濾。分別用100毫升異丙醇，100毫升丙酮和100毫升乙醚洗滌結(jié)晶體，接著在40℃真空下干燥，得到7.57克產(chǎn)品，純度為54%，含水量為3.2%和灰份為23.5%（為硫酸鋰）。

例子6

將10克由例子5所得的克拉瓦雷酸鋰溶于50毫升水中，在攪拌下，緩慢地加入75毫升50W/V氯化鋰溶液。結(jié)晶作用開始，將混合物在50℃攪拌半小時(shí)，用玻璃三角燒瓶過濾，然后用丙酮洗滌，在真空下于40℃干燥，得到5.27克產(chǎn)品，產(chǎn)率為84%，純度為80%。

經(jīng)重結(jié)晶的克拉瓦雷酸鋰的物理性質(zhì)如下：

IR〔cm-1，Nujol（商標(biāo)，一種石蠟糊）〕：3420，3010，1765，1680，1620，1400，1340，1325，1300，1220，1200，1130，1100，1060，1050，1020，990，970，950，900，880，850，730，708

〔α〕20D＝451（C＝145微克/毫升，于水中）

uvλmax＝259（C＝10微克/毫升在0.1NNaOH中）

（摩爾消光系數(shù)，ε＝19.451）

鋰含量（吸附法）＝3.3%

灰份＝26.5%為硫酸鋰。

例子7

將800ml根據(jù)例子1或4的方法所制備的發(fā)酵肉湯（其活度為1280微克/毫升）與過濾輔助劑，如0.5%Praestol一同攪拌。肉湯與Dicalite按6∶1（W/V）混合，然后小心地通過在瓷漏斗瓶的過濾紙過濾。當(dāng)肉湯經(jīng)過過濾和澄清之后，將pH調(diào)到4.0以脫除蛋白質(zhì)。將沉淀物用離心法分離。清液層在pH值為6.0的堿性IRA-68型樹脂上吸附，在柱中，過濾過的肉湯/樹脂的容積/容積，比例是10∶1。樹脂是醋酸鹽型的pH為4.0。

當(dāng)肉湯被吸附后，先用0.5%氯化鈉，后用水洗滌樹脂。用氯化鈉鋰將克拉瓦雷酸以鋰鹽的形式洗脫出來。樹脂洗脫液（510毫升，活度∶每毫升含克拉瓦雷酸4500微克）用兩倍體積的丙酮處理，沉淀物用離心法分離。清液層與5倍體積的異丙醇混合，再將其沉淀物離心分離。將清液層濃縮，讓鋰鹽在4℃結(jié)晶24小時(shí)。得產(chǎn)品1182毫克，產(chǎn)率為11.5%，純度為96.92%。

例子8

將一個(gè)總發(fā)酵肉湯（5000毫升，活度為：每毫升含克拉瓦雷酸1396微克）按例7所述方法過濾。

將濾液與一體積的丙酮，在持續(xù)攪拌下混合，然后讓它沉積15至20分鐘。將沉積物用離心法除去，丙酮?jiǎng)t用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸掉。經(jīng)澄清后的肉湯吸附在例7所述的IRA-68型離子交換樹脂上（肉湯∶樹脂＝10∶1，體積比）。按同樣方法將樹脂洗滌，克拉瓦雷酸鋰被洗脫出來后用異丙醇結(jié)晶。產(chǎn)率是20%。洗出液分成兩個(gè)級(jí)份。第一級(jí)份為650毫克，純度69.3%，總產(chǎn)率9%。第二級(jí)份為770毫克，純度98%，總產(chǎn)率11%。

純度為69.3%結(jié)晶的克拉瓦雷酸鋰含有5%鋰和35.4%硫酸鋰灰分?？死呃姿徜囉?5%氯化鋰重結(jié)晶，其產(chǎn)品有以下特性：

ε＝15908（在0.1NNaOH中）

鋰含量＝3.6%

灰分＝25%即硫酸鋰

純度＝95%

IR（石蠟糊cm-1，）3430，3010，1760，1680，1615，1375，1300，1210，1130，1105，1065，1050，1030，995，980，950，900，885，855，740，710.

例子10

按例7方法，用Praestol處理肉湯（4000毫升，活度為300微克/毫升克拉瓦雷酸）并過濾。肉湯在pH值為6.0時(shí)澄清后，通過一個(gè)IR-68和XAD-2樹脂的混合柱，其速率為：經(jīng)過過濾的肉湯的體積∶樹脂體積＝40∶1。

含有初始活度實(shí)際是100%克拉瓦雷酸的予分離柱的洗出液以肉湯∶樹脂比例（V/V）＝10∶1的速率吸附在柱上。樹脂先用0.5%氯化鈉，后用水洗滌?？死呃姿徜囉寐然囅疵摗？死呃姿岚蠢?所述方法結(jié)晶后可得首批產(chǎn)品181毫克，純度95.3%，產(chǎn)率15.08%。其物理性質(zhì)與例子7的產(chǎn)品相似。

例子11至16

這幾個(gè)例子是試圖通過各種不同的處理來使肉湯在醋酸鹽型的IRA-68樹脂中部分吸附。例子11采取的方法是肉湯先經(jīng)過過濾然后用樹脂處理。在例子12中，樹脂首先用氯化鈉溶液清洗。在例子13中，肉湯與輔助劑一同過濾。在例子14中除采用例子13的方法外，還讓肉湯在pH＝4的條件下脫除蛋白質(zhì)。在例子15中除采用例子13的方法外，還采用丙酮來使肉湯脫除蛋白質(zhì)。在例子16中除采用例子14的方法外，還用丙酮將洗出液進(jìn)行后處理。

例子耗量清洗洗出液產(chǎn)率純度

1130-400-510-155不定

12305-1010-15550-80

130-70-1505-1060-80

140-2060-7010-2080

150-207020-2280-90

160-207020-2590-95

產(chǎn)率是指第一次收集的克拉瓦雷酸鋰結(jié)晶體。最佳方法包括采用輔助劑進(jìn)行過濾，在pH＝4.0的條件下脫除蛋白質(zhì)以及在結(jié)晶之前用