本發(fā)明涉及一種αvβ3和pd-l1的雙靶點分子探針及其應(yīng)用，屬于核醫(yī)學(xué)。

背景技術(shù)：

1、盡管單靶點分子探針在臨床診斷和治療中發(fā)揮了重要作用，然而在某些情況下，對病變組織有著更高成像對比度和更高特異性的要求。與單靶點探針相比，雙靶點分子探針在腫瘤組織中表現(xiàn)出更好的特異性攝取，與兩個不同靶點的特定相互作用使這些雙靶點探針表現(xiàn)出更強的親和力和更好的靈敏度(參見文獻：dual-targeted?molecular?imagingof?cancer.j.nucl.med.2018；59(3):390-395.)。因此，應(yīng)用雙靶點分子探針可以提高腫瘤診斷的準確率。

2、腫瘤新生血管生成是腫瘤進展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，整合素在其中發(fā)揮了重要作用，尤其是整合素αvβ3，其介導(dǎo)的細胞黏附和信號傳導(dǎo)失調(diào)是許多疾病的發(fā)病機制之一。研究表明，αvβ3是腫瘤血管生成的重要標志物，在大多數(shù)正常細胞中表達較低，而在多種腫瘤細胞系則呈現(xiàn)高表達(參見文獻：a?comparison?of[18f]alf-and?68ga-labeled?dual?targetingheterodimer?fapi-rgd?in?malignant?tumor:preclinical?evaluation?and?pilotclinical?pet/ct?imaging.eur.j.nucl.med.mol.imaging.2024；51(6):1685-1697.)。αvβ3的高表達與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移性密切相關(guān)，因此，它成為腫瘤診斷和治療中的重要靶點。準確檢測αvβ3的表達水平對腫瘤的早期診斷、治療及預(yù)后評估具有重要的臨床意義。

3、基于pd-1(programmed?cell?death-1，細胞程序性死亡-配體1)/pd-l1(programmed?cell?death?ligand-1，細胞程序性死亡蛋白-1)通路的免疫療法是當(dāng)今腫瘤免疫治療領(lǐng)域的熱門。pd-l1是一種跨膜蛋白，主要表達于腫瘤細胞、免疫細胞及其他多種細胞表面，通過抑制t細胞的擴增以及γ-干擾素(interferon-γ，ifn-γ)的產(chǎn)生，調(diào)節(jié)機體免疫應(yīng)答。pd-l1與其受體pd-1結(jié)合后，能夠促進腫瘤免疫逃逸并抑制免疫反應(yīng)。因此準確檢測pd-l1的表達水平更有利對于免疫治療潛在患者進行精準篩選，可以提高患者獲益(參見文獻：high?pd-1/pd-l1?checkpoint?interaction?infers?tumor?selection?andtherapeutic?sensitivity?to?anti-pd-1/pd-l1?treatment.cancer?res.2020,80(19):4244-4257.)。

4、鑒于αvβ3和pd-l1在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的關(guān)鍵作用，并且αvβ3在腫瘤微環(huán)境中可調(diào)控pd-l1的表達，也是腫瘤免疫逃逸機制的關(guān)鍵成分之一(參見文獻：αvβ3-integrinregulates?pd-l1?expression?and?is?involved?in?cancer?immune?evasion.proc.natl.acad.sci.u.s.a.2019,116(40):20141-20150.)。故針對αvβ3和pd-l1分子開發(fā)雙靶點分子探針具有較為廣泛的臨床應(yīng)用潛力，有望使探針表現(xiàn)出更強的親和力，進而提高腫瘤診斷的靈敏度和準確率。現(xiàn)階段，靶向αvβ3和pd-l1的雙靶點的分子探針尚未見報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種αvβ3和pd-l1的雙靶點分子探針，所述分子探針具有如下所示結(jié)構(gòu)：

2、

3、其中，r為放射性核素標記基團。

4、在本發(fā)明的一種實施方式中，所述放射性核素標記基團為68ga、[18f]alf、64cu或89zr。

5、在本發(fā)明的一種實施方式中，當(dāng)放射性核素標記基團為68ga時，所述分子探針具有如下所示結(jié)構(gòu)：

6、

7、在本發(fā)明的一種實施方式中，當(dāng)放射性核素標記基團為[18f]alf時，所述分子探針具有如下所示結(jié)構(gòu)：

8、

9、在本發(fā)明的一種實施方式中，所述分子探針的標記前體具有如下所示結(jié)構(gòu)：

10、

11、本發(fā)明還提供了一種制備上述分子探針的方法，所述方法包括：將化合物imb-rgd和boc-5-aminopentanoic?nhs溶解于有機溶劑中，得到溶解液；將溶解液使用n,n-二異丙基乙胺調(diào)節(jié)ph至堿性后，在氮氣的保護下進行反應(yīng)，得到反應(yīng)液a；將反應(yīng)液a進行濃縮、乙醚沉淀、離心、干燥，得到反應(yīng)產(chǎn)物；將反應(yīng)產(chǎn)物溶解于三氟乙酸和乙腈的混合溶液中進行反應(yīng)，得到反應(yīng)液b；將反應(yīng)液b進行濃縮、乙醚沉淀、離心、干燥，得到化合物imb-rgd-1；

12、將化合物imb-rgd-1和nota-nhs溶解于有機溶劑中，得到溶解液；將溶解液使用n,n-二異丙基乙胺調(diào)節(jié)ph至堿性后，在氮氣的保護下進行反應(yīng)，得到反應(yīng)液；將反應(yīng)液進行濃縮、乙醚沉淀、離心、干燥、純化，得到分子探針的標記前體nota-imb-rgd；對分子探針的標記前體nota-imb-rgd進行放射性核素標記，得到分子探針；

13、所述化合物imb-rgd具有如下所示結(jié)構(gòu)：

14、

15、在本發(fā)明的一種實施方式中，所述化合物imb-rgd的制備方法包括：將化合物imb和fmocnh-peg2-ch2coonhs溶解于有機溶劑中，得到溶解液；將溶解液使用n,n-二異丙基乙胺調(diào)節(jié)ph至堿性后，在氮氣的保護下進行反應(yīng)，得到反應(yīng)液a；將反應(yīng)液a進行濃縮、乙醚沉淀、離心、干燥，得到反應(yīng)產(chǎn)物；將反應(yīng)產(chǎn)物溶解于有機溶劑中，得到混合液；在混合液中加入哌啶后進行反應(yīng)，得到反應(yīng)液b；將反應(yīng)液b使用酸性溶液調(diào)節(jié)ph至中性后，進行濃縮、乙醚沉淀、離心、干燥，得到化合物imb-1；

16、將化合物imb-1和bis(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)succinate溶解于有機溶劑中，得到溶解液；將溶解液使用n,n-二異丙基乙胺調(diào)節(jié)ph至堿性后，在氮氣的保護下進行反應(yīng)，得到反應(yīng)液；將反應(yīng)液進行濃縮、乙醚沉淀、離心、干燥，得到化合物imb-2；

17、將imb-2和c(rgdfk)溶解于有機溶劑中，得到溶解液；將溶解液使用n,n-二異丙基乙胺調(diào)節(jié)ph至堿性后，在氮氣的保護下進行反應(yīng)，得到反應(yīng)液a；將反應(yīng)液a進行濃縮、乙醚沉淀、離心、干燥，得到反應(yīng)產(chǎn)物；將反應(yīng)產(chǎn)物溶解于三氟乙酸、三異丙基硅烷和乙腈的混合溶液中進行反應(yīng)，得到反應(yīng)液b；將反應(yīng)液b進行濃縮、乙醚沉淀、離心、干燥、純化，得到化合物imb-rgd；

18、所述化合物imb具有如下所示結(jié)構(gòu)：

19、

20、本發(fā)明還提供了上述分子探針在制備整合素αvβ3和/或pd-l1顯像劑中的應(yīng)用。

21、本發(fā)明還提供了一種整合素αvβ3和/或pd-l1顯像劑，所述顯像劑的成分包含上述分子探針。

22、本發(fā)明還提供了上述分子探針在制備腫瘤顯像劑中的應(yīng)用。

23、在本發(fā)明的一種實施方式中，所述腫瘤包括整合素αvβ3和/或pd-l1陽性腫瘤；所述整合素αvβ3和/或pd-l1陽性腫瘤包括腦膠質(zhì)瘤、惡性黑色素瘤、結(jié)腸癌、肺癌和/或三陰性乳腺癌。

24、本發(fā)明還提供了一種腫瘤顯像劑，所述顯像劑的成分包含上述分子探針。

25、在本發(fā)明的一種實施方式中，所述腫瘤包括整合素αvβ3和/或pd-l1陽性腫瘤；所述整合素αvβ3和/或pd-l1陽性腫瘤包括腦膠質(zhì)瘤、惡性黑色素瘤、結(jié)腸癌、肺癌和/或三陰性乳腺癌。

26、本發(fā)明技術(shù)方案，具有如下優(yōu)點：

27、本發(fā)明提供了一種αvβ3和pd-l1的雙靶點分子探針，此分子探針具有以下優(yōu)勢：

28、第一，此分子探針具有優(yōu)異的靶向性，能夠同時靶向腫瘤組織中的αvβ3和pd-l1，相比單靶點探針，更加精確地定位腫瘤或病變區(qū)域，并有效減少單靶點探針可能引起的非特異性攝取；

29、第二，此分子探針能夠通過雙靶向策略，克服腫瘤異質(zhì)性，避免單靶點探針因腫瘤標志物表達差異導(dǎo)致的漏檢或誤診，提高腫瘤診斷效率；

30、第三，此分子探針的腫瘤攝取和滯留時間顯著提高，能夠確保探針在腫瘤部位的積累，從而增強成像效果并提高診斷精度；

31、第四，此分子探針的成像效果顯著提高，相比單靶點探針，雙靶點探針能夠提供更高的腫瘤攝取和更清晰的腫瘤定位，進一步提升臨床診斷的準確性和可靠性。因此，本發(fā)明的分子探針能夠通過pet成像技術(shù)動態(tài)、實時地監(jiān)測腫瘤細胞中αvβ3和pd-l1水平的變化，從而顯著提高腫瘤診斷的靈敏度和準確性。

32、進一步地，所述放射性核素標記基團為68ga和[18f]alf；這兩種核素均為短半衰期的放射性核素，單位時間內(nèi)釋放的射線較少，進一步提高了安全性。