本發(fā)明是關(guān)于制備婦產(chǎn)科（特別是子宮出血）使用的止血藥物的方法。

藥物主要原料為百合科重樓屬植物。該屬植物原主治蛇蟲咬傷、熱癤疔瘡腫毒、腮腺炎、急性喉炎、咽炎、白喉、流行性腦炎、慢性支氣管炎等。但有關(guān)它們的收縮子宮、減少子宮出血的新藥理作用，尚未見有過論述;此外，由重樓屬植物提取有效成份并制備中成藥的方法，以及利用上述新藥理作用治療功能性子宮出血和大、小產(chǎn)產(chǎn)后出血等，更未見報導(dǎo)。

本發(fā)明的目的和任務(wù)在于：探究重樓屬植物在收縮子宮、減少子宮出血的新藥理，并利用這種藥理作用研究一種用于治療婦產(chǎn)科血癥的新藥物。這種藥物實際上已經(jīng)問世，即“宮血寧”，由于其療效顯著而暢銷全國，但制備方法尚未公知。

發(fā)明人研究了多種百合科重樓屬植物，如滇重樓、華重樓、球藥隔重樓、少葉重樓、毛葉重樓、元陽重樓、維西重樓、云南重樓和七葉一枝花等。這些重樓屬植物在不同程度上均具有縮宮止血的作用。本發(fā)明人則取滇重樓〔ParisPolyphyllaSmithvar.Yunnanensis（Franch.）Hand.-Mazz〕的根莖，選用其有效部位，從中離析出有生理活性成分甙Ⅵ和甙Ⅶ。甙Ⅵ的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為偏諾皂甙元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基（1→2）-β-D-葡萄吡喃糖甙。甙Ⅶ的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為偏諾皂甙元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基（1→4）-α-L-鼠李吡喃糖基（1→4）[α-L-鼠李吡喃糖基（1→2）]-β-D-葡萄吡喃糖甙。

先將滇重樓等的根莖經(jīng)篩選后，用粉碎機粉碎成適宜于滲漉的最粗粉，然后按下述步驟和方法制備：

1、滲漉：稱取滇重樓最粗粉，以適量的80-95度的乙醇濕潤15～30分鐘，移入滲漉器，按滲漉法常規(guī)浸漬24小時后，以約1-5毫升/公斤·分的流速進(jìn)行滲漉，至滲漉液呈淡黃色為止。

2、減壓濃縮：將滲漉液吸入減壓濃縮鍋，減壓濃縮，真空度保持在200-500毫米汞柱，濃縮至稠膏狀。

3、干燥：將濃縮稠膏自減壓濃縮鍋中放出，取適量淀粉鋪在烤盤內(nèi)，再將稠膏薄薄地（＜2公分）鋪在淀粉上，然后將烤盤置于鼓風(fēng)干燥箱中，溫控幅度為60°-90℃，干燥成干浸膏。

4、粉碎：將干浸膏用粉碎機粉碎至80目以下。

5、混合：以適當(dāng)比例的干浸膏粉和淀粉置入混合機中，充分混勻，然后裝入盛具，予以密閉待用。

6、制劑：取上述粉狀混合物適量，加工成一定的劑型，如膠囊或片劑。

藥理試驗：

從滇重樓中得到的前述兩個有效單體甙Ⅵ和甙Ⅶ（甙元為Pennogenin）。這兩個有效單體的初步藥理研究結(jié)果如下：

一、實驗材料：

1、大白鼠：重150-250克，雌性，健康;

豚鼠：重350-500克，雌性，健康;

子宮肌條：由人的離體子宮健康部分制成。

2、甙Ⅵ及甙Ⅶ，均為非水溶性，加水研磨成混懸度，備用。

二、實驗方法和結(jié)果：

1、對大白鼠離體子宮的作用：取雌性、健康、無孕大白鼠5只，制得離體子宮標(biāo)本10個，用麥?zhǔn)显∶蠓ㄓ^察其對甙Ⅵ、甙Ⅶ的反應(yīng)。給予甙Ⅵ10微克/毫升和甙Ⅶ1微克/毫升洛氏液，即能引起大白鼠離體子宮明顯收縮，張力升高，且逐漸收縮幅度增加，頻率增快。其反應(yīng)隨劑量的增加而增強，但甙Ⅵ和甙Ⅶ的劑量分別達(dá)200和30微克/毫升洛氏液時，子宮均未出現(xiàn)強直收縮（圖1）。

2、對人的離體子宮肌條的作用：取其健康肌層組織，制成長、寬、厚為4×0.4×0.2公分的肌條，置麥?zhǔn)显∶笾校銣?7℃，待收縮平穩(wěn)后分別給予甙Ⅵ和甙Ⅶ各40微克/毫升洛氏液。經(jīng)12例（甙Ⅵ4例，甙Ⅶ8例）實驗，均能引起肌條興奮，呈現(xiàn)肌張力增高和收縮加強（圖2）。

3、對大白鼠在位子宮的作用：取雌性、健康、無孕大白鼠10只，烏拉坦腹腔麻醉，剖腹暴露子宮的一側(cè)，用在位子宮法測定其對甙Ⅵ、甙Ⅶ的反應(yīng)。每組五只大白鼠，經(jīng)十二指腸分別給予甙Ⅵ、甙Ⅶ各5毫克/公斤體重。結(jié)果，在30-60分鐘內(nèi)均使子宮活動逐漸加強，表現(xiàn)為張力有所升高，收縮幅度、頻率增加，且能維持一小時以上（如圖3）。

4、對豚鼠在位子宮的作用：取雌性、健康、無孕豚鼠10只，按上述方法用相同劑量測定其在位子宮對給予甙Ⅵ、甙Ⅶ的反應(yīng)。在45分鐘內(nèi)可使豚鼠在位子宮出現(xiàn)興奮，收縮頻率、幅度漸增，張力升高，同樣可維持一小時以上（如圖4）。

5、對不同生理條件下大白鼠離體子宮的作用：取間情期、動情前期和中孕期大白鼠各5只，每只取其子宮各制成標(biāo)本2個，用麥?zhǔn)显∶蠓ㄓ^察其對給予甙Ⅵ、甙Ⅶ后的反應(yīng)，以興奮、無反應(yīng)、強直為觀察指標(biāo)，實驗結(jié)果用X2法統(tǒng)計處理。結(jié)果，同一種皂甙對三種生理條件下的子宮的作用，無顯著差別（見表1）。

表1不同生理條件下大白鼠離體子宮對甙Ⅵ、甙Ⅶ的反應(yīng)

6、甙Ⅵ、甙Ⅶ與垂體后葉素之間量效關(guān)系的比較：取雌性、健康、無孕大白鼠5只，于實驗前40小時，用己烯雌酚預(yù)處理。實驗時取其子宮置麥?zhǔn)显∶?2℃的洛氏液中，其收縮變化經(jīng)微拉力換能器記錄于量程為10毫伏的單筆記錄儀上。取每個給藥劑量引起最大收縮峰值的平均值為效應(yīng)值，作縱座標(biāo)，以甙Ⅵ、甙Ⅶ的對數(shù)劑量為橫座標(biāo)，繪出量效關(guān)系曲線。垂體后葉素的單位劑量換算成毫克劑量（1毫克/1單位）。依同法繪出量效關(guān)系曲線。結(jié)果表明甙Ⅵ、甙Ⅶ與垂體后葉素一樣，對子宮的作用隨著劑量的增加而增強;在同等劑量下，兩個甙的作用都略小于垂體后葉素的作用;甙Ⅶ則比甙Ⅵ的作用稍強（圖5）。

毒性試驗：

滇重樓的提出物對子宮有明顯的生理活性，經(jīng)過鼠、兔的急性、亞急性毒性試驗，及對給藥犬的血壓、呼吸、心率的觀察證明，該提出物無明顯毒副作用;給藥1月后，動物主要內(nèi)臟心、肝、脾、肺、腎、胃、腸組織切片檢查，肝、腎功能、血象與對照組對比，均未發(fā)現(xiàn)異常。

一、急性毒性試驗：

18～22克健康、雄性小白鼠15只，均分三組，分別灌胃給予重樓提出物0.6克/公斤、1.2克/公斤、2.4克/公斤（相當(dāng)生藥5克/公斤，10克/公斤，20克/公斤），觀察三天，未發(fā)現(xiàn)動物生理現(xiàn)象異常，全部動物健康存活（見表2）。

二、對麻醉犬血壓、呼吸、心率的影響

犬3只，體重12～16公斤，經(jīng)靜脈給予戊巴比妥鈉30毫克/公斤麻醉，經(jīng)十二指腸給予滇重樓提出物60毫克/公斤及120毫克/公斤，記錄給藥前及給藥后頸動脈血壓、呼吸、心率。結(jié)果給藥后2小時內(nèi)，血壓、呼吸、心率均無明顯改變，表明該藥對動物血壓、呼吸、心率無影響。

三、亞急性毒性試驗：

雌性大白兔27只，體重1.7～2.5公斤，分為三組，第一組、第二組各10只，第三組7只;第一組為對照組，第二組口服滇重樓提出物60毫克/公斤·日;第三組口服滇重樓提出物300毫克/公斤·日，連續(xù)30天。給藥前，給藥第15天，給藥第30天后，各稱一次體重及進(jìn)行一次血象、肝、腎功能（SGPT尿素N）的檢查;給藥結(jié)束后，放血處死，取心、肝、脾、肺、腎

表2滇重樓提出物對小白鼠急性毒性試驗

、胃、腸做組織病理學(xué)檢查。

1、對兔體重的影響

實驗期間動物一般健康狀況良好，活動正常。僅大劑量組中，一只兔子后期出現(xiàn)腹瀉，消瘦。余各組給藥期間均無異常，結(jié)果見表3。

表3滇重樓提出物對大白兔體重的影響

2、血象檢查

各次檢查，均自心臟取血，結(jié)果見表4：

從表中可見用藥前后各組血象均無明顯變化。

3、對肝功谷一丙轉(zhuǎn)氨酶的測定：

采血同前，結(jié)果見表5

表5

從上表可見給藥前后谷一丙轉(zhuǎn)氨酶活性無顯著改變。

4、對腎功能N.P.N的檢查。

采血同前，結(jié)果見表6

表6

5、解剖及有關(guān)組織的鏡檢：

實驗結(jié)束將兔放血處死，解剖后肉眼觀察到對照組及給藥組有少數(shù)兔的肺部有瘀血點，經(jīng)分析認(rèn)為，此瘀血點為心臟抽血時，注射針頭刺穿肺部所致。

取心、肝、脾、肺、腎、小腸作病理切片，結(jié)果各組兔均未發(fā)現(xiàn)有明顯病理變化。

毒性試驗結(jié)果表明：

1、滇重樓提出物經(jīng)小鼠急性毒性，兔亞急性毒性試驗，及對犬的血壓、呼吸、心率的觀察，證明其毒副作用小，服藥后對動物肝腎功能及臟器組織等均無明顯影響。

2、亞急性毒性試驗中，300毫克/公斤·日組個別兔子在給藥后期出現(xiàn)腹瀉現(xiàn)象，經(jīng)分析認(rèn)為，這是提出物中大量存在的皂甙對兔腸胃道刺激所致。經(jīng)把劑量提高到600毫克/公斤·日，此現(xiàn)象更為明顯;但一經(jīng)停藥，腹瀉即可消失。

臨床試驗：

發(fā)明人在對滇重樓的藥理和毒性試驗研究的基礎(chǔ)上，以滇重樓為主要原料、按上述方法制備的藥物，為棕黃色粉末或微粒，味苦，加工成膠囊劑型或片劑型。在昆明醫(yī)學(xué)院第一、第二附屬醫(yī)院等四個醫(yī)院以膠囊劑作臨床試驗，主治功能性子宮出血癥和月經(jīng)過多癥，以及由于大小產(chǎn)后宮縮不良、避孕針?biāo)幉划?dāng)、放取宮內(nèi)節(jié)育器、盆腔炎和宮內(nèi)膜炎等所引起的子宮出血等。

試驗分兩批進(jìn)行，均系口服。一批350例，總有效率達(dá)95.7%;另一批292例，總有效率達(dá)92.2%。試驗還表明，大多數(shù)數(shù)病人無副反應(yīng)，僅有少數(shù)感覺胃腸道輕度不適;均未見有毒性反應(yīng)。

附圖說明：圖1至2中，W-反應(yīng)終止

圖1甙Ⅵ、甙Ⅶ對大白鼠離體子宮的作用

圖2甙Ⅵ、甙Ⅶ對人的離體子宮肌條的作用

圖3甙Ⅵ、甙Ⅶ對大白鼠在位子宮的作用

圖4甙Ⅵ、甙Ⅶ對豚鼠在位子宮的作用

圖5甙Ⅵ、甙Ⅶ與垂體后葉素的量效關(guān)系圖

實施例：

取1000公斤滇重樓根莖，用粉碎機粉碎成適宜于滲漉的最粗粉。取粗粉960公斤，以800公斤85度的乙醇濕潤25分鐘后，移入滲漉器。按滲漉法常規(guī)，浸漬24小時后，以4毫升/公斤·分的流速進(jìn)行滲漉，至滲漉液呈淡黃色為止。將滲漉液吸入減壓濃縮鍋進(jìn)行減壓濃縮，真空度保持在350毫米汞柱，濃縮至稠膏狀，將稠膏放出。將淀粉鋪在烤盤上，然后再將稠膏鋪在淀粉上，稠膏厚度為1.5公分，稠膏與淀粉的比例為3∶1。將烤盤移至鼓風(fēng)干燥箱中進(jìn)行干燥，溫度控制在80℃。將已干燥的干浸膏，用粉碎機粉碎至80目，然后置入混合機中，充分混勻，裝入盛具，予以密閉備用。取浸膏粉適量（相當(dāng)于滇重樓生藥2克），用膠囊自動填充機裝成1號膠囊。